如何研究一个未知基因的功能|

如何研究一个未知基因的功能

查查与其同源的基因在其它生物尤其是亲缘关系很近的生物体内有没有已经被证明功能的，或者猜想与什么功能有关的。

寻找突变体（该基因缺失的个体）或者设计序列沉默该基因，然后观察其表型和正常个体有什么差别。

寻找该基因过量表达的个体，观察表型和一般个体的差异，也可以作为一个参考。

这些知识给你的研究提供思路，最后你要克隆得到该基因，在一个该基因缺失的突变体（株）内表达该基因，如果你在该个体内检测到表达并且该个体和一般个体性状差异消失，那么证明该个体是控制此性状的基因（之一）。

如何构建一个基因的过表达载体

首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。

用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。

将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键。

再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合，形成重组DNA分子。

|如何研究一个未知基因的功能